• <noframes id="mgiwg"></noframes>
  • 相關文章
    您現在的位置:首頁 > 產品展示 > 分子生物學技術服務 > siRNA干擾檢測服務 > siRNA干擾檢測服務

    siRNA干擾檢測服務

    簡要描述:RNA干擾 (RNA interference, RNAi)技術,是將與內源mRNA 編碼區同源的小片段(19 -23bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導入細胞中,引發細胞中相應mRNA 高效特異性降解,從而導致特定基因表達沉默(knock down)的一種實驗技術。

    • 產品型號:
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2024-05-13
    • 訪  問  量:4495

    siRNA干擾檢測服務

    原理:RNA干擾 (RNA interference, RNAi)技術,是將與內源mRNA 編碼區同源的小片段(19 -23bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導入細胞中,引發細胞中相應mRNA 高效特異性降解,從而導致特定基因表達沉默(knock down)的一種實驗技術,其中通過構建表達載體表達siRNA是多種siRNA制備方法中*有可能進行長期基因沉默研究的方法,siRNA 載體可以在細胞內直接轉錄出shrna ,其干擾效果等同于siRNA ,而且能夠解決 siRNA干擾時間短的缺點。您只需提供需干擾基因的詳細信息,包括基因的 mRNA 序列,Genbank Accession No. 和所屬物種,本公司負責設計3條針對目的mRNA的siRNA 靶序列,在短時間內構建三個可用于目的mRNA干擾實驗的siRNA 載體并為您進行后續的干擾實驗研究。

    實驗流程

    ◇ 選擇siRNA表達載體 通過人工合成基因的方法將該序列克隆至Clontech公司的RNAi-Ready pSIREN系列表達載體中,該系列表達載體帶有Pol III(U6)啟動子,具有轉染效率高、操作簡單、rna沉默效果易于檢測等特點,客戶可根據需要進行選擇。

    ◇ 設計siRNA靶序列

    ◇ 根據客戶提交的目的mRNA序列,設計3條RNA干擾靶序列,靶序列一般為19-21nt 長。

    ◇ 對于每條選定的siRNA 靶序列,設計 siRNA 正義鏈和反義鏈,以 loop(9nt or 10nt) 相連,形成穩定的發卡RNA,稱為 shRNA(short hairpin RNA)。

    ◇ 合成模板 合成每條編碼 shRNA的DNA 模板,并連接到 siRNA 載體相應的多克隆位點之間。連接產物轉化DH5α大腸桿菌。

    ◇ 抽提陽性克隆質粒 公司試劑盒抽提陽性克隆載體并定量。

    ◇ 轉染細胞 質粒直接轉染或通過病毒包裝后轉染細胞,并對轉染細胞進行陽性鑒定和轉代細胞株的培養。

    ◇ 干擾效果檢測

    ◇ 基因水平上檢測 提取RNA、反轉錄、Realtime PCR檢測干擾效果(客戶自備細胞系)。

    ◇ 蛋白水平上檢測 Western Blot檢測蛋白水平干擾效果(客戶自備一抗)。

    服務周期及價格

    服務內容

    價格(¥)

    周期

    siRNA 載體構建1~3個

    1800元/個

    14個工作日

    siRNA 載體構建3~10個

    1500元/個

    20個工作日

    siRNA 載體構建10個以上

    詢價

    協商

    細胞培養、轉染

    5000元/基因

    1~2周

    基因水平上檢測干擾效果

    詢價(視檢測數量商定)

    5~6周

    蛋白水平上檢測干擾效果

    詢價(視檢測數量商定)

    5~6周

    服務說明

    ◇ siRNA服務需客戶與我們共同討論實驗方案,并提供靶基因名稱、序列或GeneBank ID和希望插入載體的名稱等,免費為您設計siRNA序列。

    ◇ 由于構建的siRNA表達載體中插入的片段可以形成hairpin結構,因此可能會影響測序。如果我們對質粒測序結果不理想時,將對由質粒擴增得到的PCR產物進行測序。

    ◇ 開始實驗時公司和客戶簽訂詳細的實驗技術服務合同、保密合同,客戶需預付合同金額的50%作為預付款。

    提供結果

    實驗報告包括:siRNA序列、構建載體的測序報告、熒光定量PCR檢測報告、Western Blot圖片及全部實驗數據和詳細的實驗步驟。

     

    留言框

    • 產品:

    • 您的單位:

    • 您的姓名:

    • 聯系電話:

    • 常用郵箱:

    • 省份:

    • 詳細地址:

    • 補充說明:

    • 驗證碼:

      請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
    主站蜘蛛池模板: 九九热精品在线| 久久精品国产福利国产秒| 久久国产精品成人免费| 国产一精品一AV一免费| 国产精品无码专区| 国产精品毛片VA一区二区三区| 国产国拍亚洲精品mv在线观看| 2022国内精品免费福利视频| 青青草原精品国产亚洲av| 99精品在线观看| 精品日韩欧美国产| 亚洲av无码成人精品区| 精品乱码久久久久久夜夜嗨| 在线观看自拍少妇精品| 99久久精品日本一区二区免费| 四虎影视884a精品国产四虎| 国产精品亚洲产品一区二区三区 | 中文字幕一区二区三区日韩精品| 国产乱子伦精品免费视频| 久久久精品国产亚洲成人满18免费网站| 最新精品露脸国产在线 | 国产亚洲精品xxx| 秋霞久久国产精品电影院| 久久精品国产99久久久香蕉| 亚洲精品国精品久久99热一| 久久精品国产免费| 欧美日韩精品系列一区二区三区国产一区二区精品 | 久久久久99精品成人片| 亚洲av无码国产精品色在线看不卡| 无码国内精品久久人妻| 国产精品无打码在线播放| 无码国产精品一区二区免费vr | 精品亚洲欧美无人区乱码| 亚洲AV无码成人精品区狼人影院 | 中文无码久久精品| 久久se精品一区二区| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃| 99久久精品免费| 2022精品天堂在线视频| 一本大道无码日韩精品影视| 亚洲欧美日韩精品久久|